FcγIIIb 多型に関連するヒト好中球プロテオミックプロファイリング

好中球は歯周病原細菌に対する重要な宿主防御機構の一部であり、特にFcγRIIAとFcγRIIIBという二つの受容体が関与しています。FcγRIIIBは好中球上で最も多く発現し、IgGとの結合を介して免疫複合体を認識し、他の受容体と協調して貪食を促進します。この受容体はNA1とNA2という遺伝子多型を持ち、それぞれの機能に差異があることが示されています。特に日本人歯周炎患者において、NA2/NA2型の割合が高いことが確認されていますが、これまでFcγRIIIBとIgGの相互作用がどのように細胞内タンパク質発現に影響を与えるかは明確ではありません。本研究の目的は、FcγRIIIb-IgGの相互作用によりNA1-NA2遺伝子型間で好中球タンパク質表現が異なることを網羅的に検証することです。

本研究では、757種類のFcγRIIIb誘導性タンパク質スポットが2次元電気泳動法により検出されました。NA1-NA2遺伝子型での比較において、5つのタンパク質スポットの発現レベルに統計的有意差が見られました。NA1/NA1型の好中球ではPADI4とannexin VIの発現が低く、Cdc42hs-Gdp complex、myosin light chain 12A、coactosin-like 1が高く発現していました。特にPADI4の発現傾向はELISA測定でも確認されました。これにより、FcγRIIIb遺伝子多型が好中球の特定のタンパク質発現に影響を及ぼすことが示唆されました。

研究対象者として、健常者40名をPCR法にてFcγRIIa、IIIb多型を同定し、FcγRIIIb-NA1/NA1および-NA2/NA2グループ各5名を選出しました。各対象者から末梢血を採取し、比重遠心法で好中球を分離しました。好中球をhu-man monoclonal IgG1 antibodiesで刺激し、FcγRIIIb誘導性タンパク質を抽出しました。その後、フローサイトメトリーを用いてFcγRIIIBの発現を比較し、ブラッドホード法でタンパク質量を測定しました。検出されたタンパク質スポットをImageMaster2Dプラチウムで解析し、統計的有意差を持つスポットを質量分析により同定しました。

本研究の結果、FcγRIIIb遺伝子多型が好中球のタンパク質発現に影響を与えることが示されました。特に、NA1/NA1型では貪食能や活性酸素能が高いことが確認されました。これにより、FcγRIIIBの遺伝子多型が免疫応答や炎症反応の調節に重要な役割を果たしている可能性が示唆されました。さらに、これらの発見は歯周炎や他の慢性炎症性疾患における病態解明や新しい治療法の開発に寄与する可能性があります。

今後の研究では、FcγRIIIb遺伝子多型と他の免疫細胞や分子との相互作用をさらに詳細に解析することが求められます。また、PADI4やannexin VIなどの特定タンパク質が好中球の機能や炎症反応にどのように影響を与えるかを明らかにするための実験が必要です。さらに、FcγRIIIb遺伝子多型が歯周病だけでなく、他の慢性炎症性疾患においてもどのような役割を果たすかを探ることで、より包括的な理解を得ることが目指されます。