腫瘍免疫担当細胞の解明と新しい免疫療法の開発

慢性骨髄性白血病（CML）は、骨髄増殖性疾患の一つで、9番染色体と22番染色体の間で相互転座が生じることによりフィラデルフィア染色体（Ph）が形成され、bcr/abl融合遺伝子が生成される。この融合遺伝子から生成されるタンパク質が強いチロシンキナーゼ活性を持ち、白血病細胞の自律的な増殖能に寄与している。第一世代チロシンキナーゼ阻害薬であるイマチニブは、CML治療において高い効果を示したが、イマチニブ抵抗性のCML症例も報告されている。このイマチニブ抵抗性のCML治療を目的として、第二世代チロシンキナーゼ阻害薬であるダサチニブが開発された。ダサチニブの治療により、多くの症例で細胞遺伝的完全寛解がもたらされ、高い無病生存率が得られている。本研究では、ダサチニブ投与による大型顆粒リンパ球（LGL）の増加機序を解明し、ダサチニブ治療を受けたCML症例のリンパ球増加による予後改善の背景を明らかにすることを目的としている。

ダサチニブは、イマチニブ抵抗性のCMLおよびフィラデルフィア染色体陽性急性リンパ芽球性白血病（ALL）の治療のために承認された第二世代チロシンキナーゼ阻害薬であり、BCR-ABLチロシンキナーゼの様々な耐性変異にも効果がある。ダサチニブ治療例において、NK細胞を主体とするLGLの増加とクローナルなγδT細胞の増加が観察された。本研究では、γδT細胞およびLAK細胞培養系を用いて、ダサチニブのNK細胞およびγδT細胞増加に対する影響を調べたところ、ダサチニブ濃度依存的にNK細胞の実数比が増加することが確認された。また、ダサチニブはIL-2添加培養PBMCのNK細胞活性を増強させることも示された。

健常成人から採取した末梢血から単核球を分離し、ダサチニブの影響を調べるために細胞濃度を調整して培養した。γδT細胞培養系では、IL-2およびゾレドロン酸を添加した培地で4日間培養し、LAK細胞培養系では、IL-2添加培地で7日間培養した。培養後、フローサイトメトリーを用いてリンパ球サブセットの解析を行った。また、ダサチニブ添加PBMCのNK活性を測定するために、エレクトロポレーション法によりEGFPを導入したK562細胞をターゲット細胞として使用し、エフェクター細胞との共培養後にフローサイトメトリーで解析した。統計解析はGraph Pad Prismソフトウェアを用いて行い、スチューデントt検定で有意差を評価した。

本研究では、ダサチニブがNK細胞の増加およびNK活性の増強に影響を与えることが示された。ダサチニブは、NK細胞を主体とするLGLの増加と関連しており、ダサチニブ治療CML症例におけるリンパ球増加が予後改善に寄与している可能性が示唆された。また、ダサチニブ添加培養PBMCがNK細胞の活性を増強することが確認され、これが腫瘍細胞の免疫逃避を抑制し、腫瘍の発生や進展を防止するための有効な手段であることが示された。これにより、ダサチニブがNK細胞の活性化を通じて抗腫瘍免疫応答を高める可能性があることが示された。

今後の研究では、ダサチニブの作用メカニズムの詳細な解明が求められるとともに、ダサチニブ治療によるNK細胞の活性化がどのように腫瘍細胞に対する免疫応答を強化するかについてのさらなる研究が必要である。また、ダサチニブ以外のチロシンキナーゼ阻害薬との比較研究や、ダサチニブと他の免疫療法との併用効果についても検討することが重要である。さらに、臨床応用に向けて、ダサチニブを用いた治療法の最適化や、治療効果を予測するバイオマーカーの開発も進めていく必要がある。これにより、CMLや他の血液がんにおける治療効果を向上させ、患者の予後を改善することが期待される。